نحوه استفاده از بطری سرم برای غیرفعال کردن سرم
به عنوان یک ماده مغذی مورد نیاز برای رشد سلول، نقش سرم در کشت سلول بدیهی است و کیفیت و عقیمی سرم نیز کلید تعیین موفقیت آزمایش است. بنابراین، چگونه سرم را غیر فعال کنیم؟ این نیاز به استفاده از بطری های سرم دارد.
مراحل غیر فعال سازی سرم به شرح زیر است:
1. بطری را انتخاب کنید که همان بطری سرم با بطری کنترل باشد، همان حجم آب مقطر سرم را در بطری کنترل بریزید و دما را اندازه بگیرید.
2. تنظیم دما. دو دماسنج جیوه ای را در بطری گروه کنترل قرار دهید و آنها را در حمام آب قرار دهید. وقتی دماسنج 56 درجه را نشان داد، دمای حمام آب کالیبراسیون را روی 56 درجه تنظیم کنید.
3. بطری سرم و بطری کنترل را کنار هم در یک حمام آب قرار دهید و دما را روی 56 درجه تنظیم کنید و به مدت نیم ساعت حمام آب بگیرید. پس از غیرفعال شدن، آنها را در بطری ها تقسیم کنید، آزمایش های آسپتیک انجام دهید و در دمای -70--20 درجه نگهداری کنید.
4. برای رعایت رنگ و شفافیت سرم منجمد، اگر رنگ مایل به قرمز یا رنگ روشن تر همراه با بارندگی باشد، به این معنی است که کیفیت سرم خوب نیست، بنابراین باید یک سرم باکیفیت برای غیرفعال سازی انتخاب شود. .
5. در استفاده از سرم باید از ذوب مکرر جلوگیری شود که احتمال آلودگی سرم را افزایش داده و کیفیت سرم را کاهش می دهد. هنگامی که سرم مکرر ذوب شده رسوب می کند، به این معنی است که سرم در دسترس نیست یا کیفیت پایینی دارد.
6. برای اطمینان از پایداری نتایج آزمایشی، اطمینان حاصل کنید که سرم باید در هنگام تقسیم بطری به خوبی تکان داده شود و سپس بطری را تقسیم کنید و سعی کنید از همان سرم برای اطمینان از اصل متغیرهای یکنواخت استفاده کنید.
موارد فوق مراحل خاص غیرفعال سازی سرم با استفاده از بطری های سرم می باشد، اما قابل ذکر است که در اکثر کشت های سلولی غیرفعال سازی حرارتی سرم ضروری نیست. در بسیاری از موارد، غیرفعال سازی حرارتی رشد سلولی را بهبود نمی بخشد، بلکه سرم را از بین می برد و بارش را افزایش می دهد. مگر اینکه ادبیات استفاده از سرم غیرفعال شده را برای سلول ها نشان دهد، مرحله غیرفعال سازی حرارتی سرم به طور کلی می تواند برای کشت سلولی حذف شود.
