کاربرد بطری سرم

کاربرد بطری سرم

بطری سرم از شیشه بوروزیلیکات با استخراج کم ساخته شده است، و بطری روشن بی رنگ الزامات USP نوع اول و ASTM E 438 نوع اول استاندارد کلاس A را برآورده می کند. این را می توان در 121 درجه سانتی گراد به مدت 20min اتوکلاو, و می تواند به تقسیم 125ml, 250ml, 500ml, 1L, 2L با توجه به حجم.

بطری سرم ظرفی برای نگهداری سرم است که عموماً از ماده PET با فرایند دمیدن کشش تزریقی ساخته می شود. محیط غذایی مورد نیاز برای رشد سلول است. با توجه به منبع آن به محیط مصنوعی و محیط طبیعی تقسیم می شود که هر دو می توانند در بطری های سرم ذخیره شوند.

بطری سرم

محیط طبیعی:

شایع ترین محیط طبیعی استفاده می شود سرم، اساسا سرم گوساله است. سرم حاوی انواع عوامل رشد سلولی، عوامل ترویج کننده چسبش و مواد چند فعال آن ها است. همراه با محیط مصنوعی، سلول ها می توانند تکثیر شوند و هموار رشد کنند. سرم باید در بطری های سرم ویژه در دمای ۵- تا ۲۰- درجه سانتی گراد ذخیره شود.

محیط مصنوعی:

محیط مصنوعی با توجه به نوع و کمیت مواد مورد نیاز سلول ها به شدت فرموله می شود. انواع و اجزای شناخته شده زیادی وجود دارد که کنترل شرایط تجربی را تسهیل می کند. حاوی کربوهیدرات ها، اسیدهای آمینه، چربی ها، نمک های معدنی، ویتامین ها، عناصر ردیابی و عوامل رشد سلول است. با این حال، در مقایسه با محیط طبیعی، برخی از اجزای ناشناخته طبیعی را نمی توان با اجزای شیمیایی شناخته شده جایگزین کرد. بنابراین محیط مصنوعی اساسی مورد استفاده در کشت سلولی نیز باید مقدار مشخصی از اجزای متوسط طبیعی را برای غلبه بر کشت مصنوعی اضافه کند. پایه ناکافی، رایج ترین عمل اضافه کردن سرم گوساله است.

شکل بطری سرم مربع، آسان برای درک، مقاوم در برابر اکثر خوردگی اسید و آلکالی، دمای جنین ۷۰- درجه سانتی گراد است، و هنوز هم چقرمگی خاصی در دمای ۳۰- درجه سانتی گراد دارد. ظرف بسته بندی خوبی است، چه محیط طبیعی باشد و چه کشت مصنوعی. می تواند در بطری های سرم ذخیره می شود.

برای جداسازی، کشت و شناسایی سلول های تولید کننده آندوتلیال خون بند ناف انسان و ایجاد داربست های عروقی سلولی به روش فریز-ثاو بهبود یافته

برای کشف امکان سنجی و ارزش کاربرد بالینی سلول های تولید کننده آندوتلیال جدا شده و کشت شده از خون بند ناف انسان.

روش بررسی: خون بند ناف جنين های تحت سزارین تمام مدت در بخش زنان و زایمان، اولین بیمارستان وابسته به دانشکده پزشکی Bengbu جمع آوری و در یک بطری سرم حاوی هپارین 50U/ml در شرایط آسپتیک، ذخیره شده در یک جعبه یخ 4 درجه سانتی گراد، و انتقال به سلول ها در اتاق کشت، سلول های تک هسته ای خون بند ناف با استفاده از سنتریفوژ گرادیان چگالی به دست آمده است. سلول های تک هسته ای به دست آمده به دو بخش و محیط M199 سرم گوساله جنین (FCS-M199) و محیط اتولوگ M199 سرم (AS-M199) اضافه شدند. و در ظروف کشت با و بدون فیبرونکتین انسانی (HFN) (مشخص شده به ترتیب F(0)، F(1)، A(0)، A(1)) بذرپاشی شدند. القای آزمایشگاهی، دیمیتاسیون و انبساط انجام شد.

تغییرات مورفولوژیک سلول های پایبند در طول کل فرایند القای و تزویر مشاهده شد، و آنها از زوایای مختلف همراه با تکنیک های مرتبط مانند ایمونوهیستوشیمی، ایمونوفلوئورسانس و فلوسیتومی شناسایی شدند.

يافته ها: پس از 12 روز کشت، سلول های مونو هسته ای خون بند ناف شروع به چسبيدن کردند. پس از 3d، شکل دفن شروع به ظاهر شدن کرد و سپس تعداد سلول های چسبنده به تدریج افزایش یافت و به تدریج دفن شکل شد. هنگامی که تا یک هفته کشت, مستعمره معمولی تشکیل شده با سلول های دفن در اطراف و سلول های گرد در مرکز. هنگامی که سلول ها به مدت ۱۴ روز کشت داده شدند، خوشه های سلولی به هم پیوسته به تدریج به هم متصل شدند و ساختاری شبیه شبکه تشکیل دادند. در عین حال، با افزایش مداوم زمان کشت، سلول های دفن بلند نیز شروع به کوتاه شدن تدریجی کردند، و یک تغییر سنگ مانند سنگ فرش معمولی را نشان دادند.

سلول های پایبند به مدت یک هفته کشت داده شدند و مشاهده شد که تعداد سلول های محیط با فیبرونکتین انسان به طور قابل توجهی بیشتر از آن بدون فیبرونکتین انسان است و تغییر قابل توجهی در تعداد سلول ها در دو محیط مختلف وجود نداشت. #Instrument مواد مصرفی #