1. چگونه همولیز را قضاوت کنیم؟
به طور کلی، نمونه پس از سانتریفیوژ برای قضاوت در مورد همولیز مشاهده می شود، اما گاهی اوقات پس از سانتریفیوژ، اگر به طور تصادفی تکان داده شود، نمونه کمی کدورت قرمز رنگ دارد که اگر دقت نکنید، می تواند به عنوان همولیز در نظر گرفته شود. بنابراین، چگونه می توانیم تشخیص دهیم که همولیز واقعی است؟ بهترین راه اندازه گیری میزان هموگلوبین در سرم، یعنی شاخص همولیز، برای اطلاع از وجود همولیز است.
به طور خاص، چگونه می توان تشخیص داد که آیا نمونه تحت همولیز و همولیز بالینی قرار گرفته است؟ روش مرسومتر فعلی قضاوت بر اساس شاخص همولیز (HaemolysisIndex یا HI) است. شاخص همولیز در واقع سطح هموگلوبین آزاد در پلاسما است. برخی از محققان 50 مطالعه را در مورد همولیز مقایسه کردند و دریافتند که 20 مورد از آنها از شاخص همولیز برای تعریف همولیز استفاده می کنند، 19 مورد از آنها از بازرسی چشمی استفاده می کنند و 11 مورد از آنها روش را نشان نمی دهند.
عمل استفاده از همولیز بصری برای انتخاب نمونه های بالینی نادرست تلقی می شود زیرا فاقد استانداردهای کمی عینی است و حساسیت شاخص های مختلف به همولیز را در نظر نمی گیرد. در یک مطالعه در Crudia در سال 2018، افراد به دقت 495 نمونه خون و نتایج آزمایش را در اتاق اورژانس پیگیری کردند و دریافتند که قضاوت بصری همولیز میتواند تا 31 درصد از نتایج آزمایش، از جمله 20.7 درصد، نامناسب باشد. در مورد، همولیز بر نتایج تأثیر داشت اما نادیده گرفته شد. در 10.3 درصد موارد، نتایج آزمایش به حالت تعلیق درآمد اما بعداً مشخص شد که تحت تأثیر همولیز قرار نمیگیرد.
در مطالعاتی که از شاخص همولیز استفاده می شود، میانگین مقدار حدی شاخص همولیز 846 میلی گرم در لیتر هموگلوبین است، اما فاصله آن بسیار زیاد است و از 150 میلی گرم در لیتر تا 3000 میلی گرم در لیتر متغیر است. دلیل فاصله زیاد مربوط به تحمل اندیکاتورهای مختلف آزمایش به همولیز است. در حال حاضر، در اکثر ابزارهای بیوشیمیایی، شاخص همولیز در حال حاضر یک شاخص مستقل است، به طوری که تمام نمونه های خونی که روی دستگاه آزمایش می شوند را می توان برای درجه همولیز کالیبره کرد و شاخص همولیز و شاخص های بالینی مختلف را می توان به تدریج جمع کرد. در عمل به منظور تعیین درجه تحمل شاخص های مختلف به همولیز به صورت کمی.
2. علل همولیز
علت همولیز از منظر اینکه آیا به فرآیند معاینه بالینی مربوط است یا خیر، می تواند به همولیز مرتبط با معاینه بالینی و همولیز غیر مرتبط با معاینه بالینی تقسیم شود. همولیز مرتبط با معاینه بالینی به همولیز اطلاق می شود که در اثر پارگی گلبول های قرمز به دلیل عملکرد نادرست معاینه بالینی رخ می دهد. این محور بحث ماست. عمل بالینی و ادبیات مرتبط ثابت کرده است که وقوع همولیز مستقیماً با فرآیند جمع آوری نمونه ارتباط دارد. در معاینه بالینی، اگر قطر سوزن خونگیری خیلی کم باشد، سرعت خونگیری خیلی زیاد باشد، نقطه نمونه گیری خون به درستی انتخاب نشده باشد، تورنیکه برای مدت طولانی استفاده شود، لوله های خونگیری ناکافی، تکان دادن بیش از حد پس از خون جمع آوری، تکان دادن زیاد در حین حمل و نقل و غیره باعث همولیز می شود. می توان آن را به موارد زیر تقسیم کرد:
مجموعه نمونه
آسیب جمع آوری خون، مانند قرار دادن مکرر سوزن و جمع آوری خون در محل هماتوم. جمعآوری خون از دستگاههای دسترسی عروقی مانند سوزنهای وریدی، لولههای تزریق، کاتترهای ورید مرکزی و جمعآوری خون از سرنگ. ورید میانی آرنج قدامی، ورید سفالیک و وریدهای گران قیمت ترجیح داده نمی شوند. سوزن های ظریف استفاده می شود؛ ضدعفونی کننده خشک نیست. تورنیکه بیش از 1 دقیقه استفاده شده است. در زمان مخلوط نمی شود، به شدت تکان می خورد و مخلوط نمی شود. حجم جمع آوری خون کافی نیست و مقیاس اندازه گیری خلاء لوله جمع آوری خون به دست نمی آید. کیفیت لوله جمع آوری خون خلاء و ژل جداسازی ضعیف است. از لوله جمع آوری خون خلاء با ظرفیت بالا و غیره استفاده می شود.
نکته قابل توجه این است که در یک مطالعه در ایالات متحده، 853 نمونه برای مقایسه دو مسیر جمع آوری خون مورد استفاده قرار گرفت. این دو راه، جمع آوری خون با خلاء وریدی و جمع آوری خون با کاتتر وریدی است. بروز همولیز در خون گرفته شده از طریق کاتترهای وریدی پیدا شد. میزان همولیز هنگامی که خون مستقیماً از ورید با سوزن گرفته می شود 0.3 درصد است و بروز همولیز از طریق کاتتر وریدی به طور قابل توجهی بیشتر از استخراج مستقیم با سوزن است. در مطالعه دیگری، دو حالت دیگر، یعنی ترکیب کاتتر وریدی و لوله جمعآوری خون با خلاء مقایسه شد. در مقایسه با همکاری مستقیم کاتتر وریدی و سوزن، مشخص شد که بروز همولیز در اولی به طور قابل توجهی بیشتر بود. استفاده از سوزن های بال پروانه می تواند بروز همولیز را کاهش دهد، صرف نظر از اینکه آیا با کاتتر داخل وریدی مطابقت دارد یا خیر. استفاده از سوزنهای کالیبر کوچک ({4}}سوزنهای اندازهگیری یا کوچکتر) میتواند وقوع همولیز را به میزان قابل توجهی افزایش دهد. از تعدادی از مشاهدات مقایسه ای بالینی، می توان دریافت که علت اصلی فیزیکی همولیز مربوط به معاینه بالینی، نیروی برشی بیش از حد در مراحل خاصی از معاینه بالینی است که از جریان خون طبیعی گلبول های قرمز در بدن فراتر می رود. استرس در روند تغییر، در نتیجه باعث پارگی غشای سلولی می شود. دقیقاً به دلیل همین اصل است که عملیات نامناسب فوق الذکر مانند قطر سوزن خونگیری بسیار کم، سرعت خونگیری بسیار زیاد، مسیر خونگیری بیش از حد طولانی و لرزش بیش از حد در حین حمل و نقل است. باعث همولیز خواهد شد.
انتقال نمونه
لرزش شدید در هنگام انتقال پنوماتیک؛ زمان حمل و نقل طولانی؛ دمای بیش از حد بالا و لرزش شدید وسیله نقلیه و غیره.
پردازش نمونه های آزمایشگاهی
زمان نگهداری نمونه طولانی است. دمای نگهداری نمونه خیلی بالاست. به موقع سانتریفیوژ نشده است. خون قبل از سانتریفیوژ به طور کامل منعقد نمی شود. دمای سانتریفیوژ خیلی زیاد است و سرعت آن خیلی سریع است. سانتریفیوژ مجدد و غیره
همولیز در بدن
همولیز خود ایمنی، مانند انتقال خون ناسازگار؛ بیماری های ژنتیکی و متابولیک، مانند تالاسمی، دژنراسیون کبدی؛ واکنش همولیتیک دارو پس از مصرف دارو، مانند واکنش همولیتیک حاد ناشی از سفتریاکسون سدیم داخل وریدی. عفونت شدید؛ عروق منتشر انعقاد داخلی; استنتهای قلب، دریچههای مصنوعی قلب، درمان اکسیژنرسانی غشای خارج بدن و غیره. آزمایشگاه همولیز نمونههای ناشی از همولیز در بدن نباید رد شود و پزشک باید در فرم درخواست اشاره کند.
علاوه بر این، همولیز غیر بالینی مربوط به معاینه به دلایل پاتولوژیک ایجاد می شود، و شاخص های تشخیص مستقل وجود دارد، زیرا تمرکز این مقاله نیست، بنابراین من آن را تکرار نمی کنم.
3. تأثیر نمونه های همولیز شده در معاینه بالینی
عوامل زیادی وجود دارد که بر دقت نتایج آزمایش تأثیر می گذارد، از جمله قبل از تجزیه و تحلیل، در طول تجزیه و تحلیل و بعد از تجزیه و تحلیل. قبل از تجزیه و تحلیل، عوامل تأثیرگذار نسبت زیادی را به خود اختصاص دادند. به هر حال، ما نمیتوانیم بدانیم که نمونه قبل از اینکه به آزمایشگاه بیاید، چه چیزی را پشت سر گذاشته است. بنابراین زمانی که با نتایج غیرعادی مواجه می شویم باید آن ها را از منظر آزمایشگاهی و بالینی مورد تجزیه و تحلیل علمی قرار دهیم. برای نتایج غیرقابل توضیح، باید بیشتر با کلینیک در ارتباط باشیم. این به ما کمک می کند تا مشکلات را به موقع کشف کنیم و با جمع آوری مجدد نمونه ها دوباره بررسی کنیم. برای حل مشکل، می توان نتیجه آزمایش دقیق تر و مطمئن تری به دست آورد.
همولیز اثرات متفاوت، کمی و قابل توجهی بر تعدادی از شاخص های آزمایش بالینی دارد. بنابراین، ضمن ارائه کیفیت نمونههای بالینی و پرهیز از همولیز مرتبط با آزمایشات بالینی، لازم است عوامل همولیتیک در فرآیند تحلیل بالینی، وجود و تأثیر این شاخص را به طور کامل در نظر گرفته و به طور فعال شاخص همولیز مرتبط با شاخص را توسعه دهد. تا از اعتبار داده های معاینه بالینی اطمینان حاصل شود.