نحوه تشخیص ویروس

برای بیماری های ناشی از عفونت های ویروسی، به منظور روشن شدن انواع ویروس های مورد درمان، می توان دو نوع بازرسی زیر را انجام داد:

1. تشخیص مستقیم خود ویروس

2. می تواند آنتی ژن روی سطح ویروس و اسید نوکلئیک ویروس را تشخیص دهد.

این آزمایش آنتی بادی های تولید شده برای مقاومت در برابر ویروس را شناسایی کرد:

در شرایط عادی، آزمایش آنتی ژن نیازی به شرایط آزمایشگاهی بالا ندارد و عمدتاً برای غربالگری در مقیاس بزرگ در بیمارستان های اولیه مناسب است. آزمایش آنتی بادی آسان است و نتایج آزمایش را می توان در 10-15 دقیقه به دست آورد. تشخیص نوکلئیک اسید به شرایط آزمایشگاهی، پرسنل متناوب و تجهیزات زیادی نیاز دارد، اما صفحه نتیجه حساس ترین و دقیق ترین است.

از 10 معرف جدید تشخیص اسید نوکلئیک کروناویروس تایید شده، 8 مورد از آنها از روش PCR فلورسنت استفاده می‌کنند و روش‌های تشخیص باقیمانده روش توالی‌یابی پلیمریزاسیون ترکیبی پروب لنگر و روش تراشه‌های تقویت دمای ثابت است.

1. روش فلورسانس PCR

روش PCR به واکنش زنجیره ای پلیمراز اشاره دارد که می تواند مقدار کمی DNA را به میزان زیادی افزایش دهد. هنگامی که برای تشخیص کروناویروس جدید استفاده می‌شود، چون کروناویروس جدید یک ویروس RNA است، لازم است قبل از انجام تشخیص PCR، رونویسی معکوس RNA ویروس به DNA انجام شود.

اصل تشخیص PCR فلورسنت این است که با ادامه PCR، محصولات واکنش به انباشته شدن ادامه می‌دهند و شدت سیگنال فلورسانس نیز به نسبت افزایش می‌یابد. در نهایت، تغییر در مقدار محصول با تغییر در شدت فلورسانس کنترل می‌شود و در نتیجه منحنی تقویت فلورسانس به دست می‌آید.

در حال حاضر این رایج ترین روش برای تشخیص اسید نوکلئیک کروناویروس جدید است. با این حال، عوامل زیر ممکن است باعث ایجاد خطا در نتایج آزمایش شوند:

ذخیره سازی نامناسب یا عدم ارسال برای آزمایش: ویروس های RNA به راحتی تجزیه می شوند. بنابراین، پس از اخذ نمونه های بیمار، باید آنها را به صورت استاندارد نگهداری کرد و در اسرع وقت آزمایش کرد. در غیر این صورت، احتمالاً نتیجه آزمایش نادرست است.

تفسیر خطای نتایج: محصولات آزمایشی تایید شده در حال حاضر بر اساس چارچوب خواندن باز 1a/b، پروتئین پاکت و پروتئین نوکلئوکپسید ژنوم کروناویروس جدید انتخاب شده‌اند. با این حال، پرایمرهای تشخیص و طرح های کاوشگر محصولات مختلف متفاوت است، و تفاوت هایی در تشخیص و تفسیر بخش های تک هدف، بخش های هدف دوگانه و بخش های سه هدف وجود دارد. بنابراین، اگر تفسیر به طور دقیق مطابق دستورالعمل های مختلف انجام نشود، ممکن است منجر به قضاوت اشتباه در مورد نتیجه شود.

2. روش توالی یابی پلیمریزاسیون لنگردار با پروب ترکیبی

این تشخیص عمدتاً برای استفاده از یک ابزار ویژه برای تشخیص توالی ژنی است که توسط نانوکره‌های DNA روی اسلاید توالی‌یابی انجام می‌شود.

این نوع تشخیص حساسیت بالایی دارد و به راحتی نمی توان تشخیص را از دست داد، اما نتایج نیز به راحتی تحت تأثیر عوامل زیادی قرار می گیرند، از جمله:

نمونه ها به موقع آزمایش نمی شوند: مانند روش فلورسنت PCR، اگر به صورت استاندارد ذخیره نشود و در اسرع وقت آزمایش نشود، ممکن است نتایج نادرست باشد.

دمای اتاق محل تست خیلی زیاد است: این امر بر دقت نتایج آزمایش نیز تأثیر می گذارد. ابزارها و کیت های مختلف آزمایش نیز ممکن است بر نتایج تأثیر بگذارند.

3. روش تراشه تقویت دمای ثابت

تشخیص تراشه ژن یکی از روش های سنتی تشخیص ویروس شناسی است. اصل تشخیص یک روش تشخیص است که بر اساس ویژگی های اتصال مکمل اسیدهای نوکلئیک توسعه یافته است، که می تواند برای اندازه گیری کیفی یا کمی اسیدهای نوکلئیک موجود در موجودات مورد استفاده قرار گیرد. در مقایسه با PCR، تراشه ژن دارای دقت بالاتر و زمان کوتاه‌تری است، اما همچنین گران‌تر است و توان تشخیص (مقدار داده‌ای که می‌تواند در واحد زمان تولید شود) نسبتاً کمتر است.

تراشه ترموستات تایید شده این بار می تواند شش نوع ویروس تنفسی از جمله کروناویروس جدید را شناسایی کند. نتایج را می توان در عرض 1.5 ساعت به دست آورد،

در مقایسه با PCR، تراشه ژن دارای دقت بالاتر و زمان کوتاه‌تری است، اما قیمت آن گران‌تر است و توان تشخیص (مقدار داده‌ای که می‌توان در واحد زمان تولید کرد) نسبتاً کمتر است.

4. تشخیص آنتی بادی ویروس

معرف های تشخیص آنتی بادی برای شناسایی آنتی بادی های IgM یا IgG تولید شده توسط بدن انسان پس از ورود ویروس به بدن انسان استفاده می شود. آنتی بادی های IgM زودتر و آنتی بادی های IgG دیرتر ظاهر می شوند.

در حال حاضر، پنج معرف جدید تشخیص آنتی‌بادی کروناویروس که تأیید شده‌اند از روش طلای کلوئیدی و روش نورتابی شیمیایی ذرات مغناطیسی استفاده می‌کنند.

5. روش طلای کلوئیدی

روش طلای کلوئیدی از کاغذ تست طلای کلوئیدی برای آزمایش استفاده می کند، که کاغذ آزمایش سریع است که اغلب در حال حاضر به آن اشاره می شود.

این نوع کاغذ تست دارای علامت گذاری و دارای سوراخ هایی بر روی آن است که برای چکاندن نمونه سرم آزمایش شونده استفاده می شود. روی کاغذ تست طلای کلوئیدی دو خط وجود دارد که یکی خط تست و دیگری خط کنترل کیفیت نامیده می شود. اگر هر دو خط رنگی باشد به معنای مثبت است. فقط خط کنترل کیفیت رنگی است که به معنای منفی است. به جز این دو مورد، به نتیجه Invalid تعلق دارد.